Egyedi peptidszintézis szolgáltatások

 

A Biorunstar egy teljes körű{0}}szolgáltatást nyújtó peptidgyártó cég. Az egyedi peptidtermékek elkészítéséhez szilárd-fázisú peptidszintézist, oldatos-fázisú szintézist és mikrohullámú szintézis kémiát alkalmazunk. A kívánt csúcsot preparatív HPLC-vel tisztítjuk, és a végső peptidmintát fordított -fázisú HPLC-vel újra elemezzük a tisztaság igazolására. Tömegspektrometriát használnak a peptid tömegének megerősítésére, és HNMR-elemzési jelentéseket biztosítanak a speciális kis vegyület{7}}peptid komplexek igazolására.

 

A peptidszintézis szolgáltatási körének áttekintése

A szekvencia hossza 2-120 aminosav
Peptid mennyisége mg - kg-tól
Different levels of purity, crude, desalt, >70, >80, > 90, >95% and >98%
Ciklikus peptidek - Cys to Cys, Head to Tail, Belső laktám
Egyszerű és összetett peptid módosítások
Havi szállítási kapacitás több mint 1000 peptid
Megfelelő méretű alikvotok az ügyfél kérésének megfelelően

 

A Biorunstar-tól rendelt egyedi peptidek többsége 2-3 héten belül szállítható. Az átfutási idő általában a peptid hosszától, mennyiségétől és összetettségétől függően változik. Minden peptidet szigorú analitikai előírásokkal látunk el, amelyek magukban foglalják a HPLC kromatogramokat a tisztaság biztosítására és a tömegspektrum elemzést az azonosság megerősítésére.

 

A C-terminálison módosított peptidszintézis

C-végállomás	Struktúra Show	C-végállomás	Struktúra Show
Amidáció		CMK/FMKCloro(fuoro)-metilketonok
Aldehid		észter (OMe/OEt)
Alkoholok		Hidrazid
ciszteamid (Merkaptoacetamid)		OSU
AMC 7-amino-4-metil-kumarinil		pNA (p-nitroanilid)
AFC 7-amino-4-(trifluor-metil)-2-benzopiron

 

A peptid szintézis módosítása: Nvégállomás

N-végállomás	Szerkezet bemutató	N-végállomás	Szerkezet bemutató
Acetilezés		3-indolil-ecetsav
Benzoil (Bz)		MpaInAA (3-merkaptopropil)
CBZ (Benziloxikarbonilezés)		Szukciniláció
Bróm-acetil (Br-Ac)		MCA6-Maleimidohexánsav
Formiláció		tioészter
Hidroxámsav

 

Peptidamidálás és peptid-acetilezés

Ha a peptid egy belső fehérjeszekvenciából származik, a fehérjében a peptidfragmens végei amidok (CONH2) lennének, így a C-terminális amidálása és az N-terminális acetilezése ezt a természetes állapotot utánozza. Ezek a módosítások megszüntetik a peptid töltését, és segítenek megvédeni az enzimes lebomlással szemben.

 

Peptid-amidálás.	Peptid-acetilezés

 

Aldehid peptid:A peptid-aldehidek különböző enzimeket gátolnak. Ezenkívül a peptid-aldehidek nagy érdeklődésre tartanak számot a peptidváz módosítására vagy ligálási reakcióira.

 

CMK/FMK jelölt peptid:A peptid-klór-metil-ketonok (CMK) a szerin-proteázok nagyon erős és irreverzibilis inhibitorai. Elérhetőség a peptid szekvenciától függően.

 

Eszter (OMe/OEt) : Struktúra{0}}aktivitási kapcsolatokhoz (SAR), töltés eltávolításához, prodrughoz.

 

p-Nitro-anilin: egy kromogén, amelyet kolorimetriás enzimszubsztrátként használnak számos standard enzimes küvettában. A gerjesztés maximuma 410 nm.

 

Formilált peptid:A formil peptid receptor (Fpr) család jól ismert a humán és rágcsáló leukociták kórokozói elleni immunvédelméhez való hozzájárulásáról.

 

Koleszterin konjugáltpeptid:a koleszterin{0}}konjugált vegyületek hatékonyan gátolják a fertőzőképességet és a membránfúziót. A koleszterin egy N-- vagy C--terminálisan inszertált ciszteinen keresztül konjugálható peptidhez.

Choleszterin konjugálta peptid C{0}}terminálisán:

 

Zsírsavval konjugált peptidek:A zsírsavkonjugált peptidek felhasználhatók antibakteriális aktivitásra vagy eukarióta sejttoxicitásra és így tovább. zsírsavak, mint a kaprilsav (C8), kaprinsav (C10), laurinsav (C12), mirisztinsav (C14), palmitinsav (C16) vagy sztearinsav (C18) stb., amelyek általában a peptid N--terminálisán vagy a C--terminálison lizin oldalláncon keresztül konjugálva.

 

A peptidszintézisben használt linkerek, távtartók

A tervezéstől és az alkalmazástól függően távtartót/linkert helyezhetünk be a címkék, fehérje (KLH, BSA) biotin vagy fluoreszcens és a peptidek közé. Gyakori hidrofób távtartó az amino-hexánsav (Ahx), és egy általános hidrofil távtartó a poli(etilén)glikol (PEG).Mások az alábbi táblázatban találhatók: például Gly, AEA, Ava, ANP Linker, Beta-Alanine, C12, GABA stb...

 

Név	Hossz (kötvények száma)	Szerkezet
(2-amino-etoxi)-ecetsav (AEA)	6
4-Aminovajsav (GABA)	5
5-aminovalérsav (Ava)	6
Aminohexánsav (Ahx)	7
12-amino-dodekánsav (c12)	13
3-amino-3-(2-nitro-fenil)-prepánsav (ANP linker)
Béta-alanin	4
Mini-PEG	9
SZEG

 

 

Milyen sóformát részesítenek előnyben az egyedi peptidekhez?

 

Az SPPS által szintetizált egyedi peptideket alapértelmezés szerint trifluor-ecetsav (TFA) sóként szállítják. Ennek az az oka, hogy a TFA-t a peptidnek a szilárd hordozógyantáról való lehasítása és az aminosav-oldalláncok védőcsoportjainak eltávolítása során használják fel, továbbá a TFA-t általában a peptidek HPLC-s tisztítására szolgáló pufferrendszer összetevőjeként használják. A TFA-tartalom jellemzően 10% és 45% között van, attól függően, hogy hány Arg-, Lys- és His-csoport van a szekvenciában.

 

Egyes sejtes vizsgálatokban, állatkísérletekben és preklinikai kutatási esetekben a maradék TFA potenciálisan a kísérletek kudarcát okozhatja. A kutatók dönthetnek úgy, hogy eltávolítják a TFA-t, vagy acetát- vagy hidrokloridsóvá alakítják. A további TFA-eltávolítási folyamat miatt a költségek körülbelül 20%-kal nőnek. A Biorunstar biztosíthatja a TFA eltávolítását (TFA-val<1% guarantee) and TFA convert it to acetate or HCl salts services ( with TFA<0.1% guarantee) .